Seleção de mídia de biofiltro para largemouth bass- Características do biofilme e desempenho de crescimento
Robalo Largemouth (Micropterus salmoides), também conhecido como baixo da Califórnia, pertence a Actinopterygii, Perciformes, Centrarchidae, Micropterus. É nativo da Califórnia, EUA, e apresenta vantagens como rápido crescimento, sabor delicioso, nutrição rica e alto valor econômico. Tornou-se uma das importantes espécies de aquicultura de água doce na China. Nos últimos anos, num contexto de transformação e modernização da pesca e do desenvolvimento vigoroso da pesca digital e inteligente, a aquicultura de recirculação industrializada emergiu gradualmente. O modo de aquicultura do largemouth bass também está mudando da cultura tradicional do lago para o modo de aquicultura de recirculação verde e eficiente. A aquicultura recirculante tem vantagens como economia de água e terra, alta densidade populacional e gerenciamento conveniente. Através de métodos e equipamentos físicos, biológicos e químicos, os sólidos suspensos e as substâncias nocivas no corpo d'água são removidos ou convertidos em substâncias inofensivas, de modo que a qualidade da água atenda às necessidades normais de crescimento das espécies cultivadas, realizando assim a reciclagem da água em condições de aquicultura de alta{6}}densidade. Alcançou bons benefícios econômicos em múltiplas espécies cultivadas.
Atualmente, a pesquisa sobre a aquicultura recirculante de largemouth bass concentra-se principalmente na reprodução, nutrição alimentar, seleção de cepas, alimentação precisa, mudanças no ambiente aquático e qualidade nutricional. A pesquisa sobre aquicultura de recirculação industrializada interna de largemouth bass concentra-se principalmente no cultivo de peixes juvenis de grande-tamanho, e a piscicultura-de ciclo completo de peixes adultos não tem sido amplamente promovida. O principal desafio enfrentado pela aquicultura de recirculação do robalo é manter um bom ambiente aquático sob condições de alta-densidade para garantir o crescimento normal das espécies cultivadas. O tratamento da água é o núcleo da aquicultura recirculante, e os meios de biofiltro para tratamento de água eficiente são a base do sistema de tratamento de água. Embora existam muitos relatórios sobre a purificação de água por meio de biofiltro, faltam relatórios específicos sobre a aquicultura recirculante industrializada de largemouth bass, especialmente em relação à triagem de meios de biofiltro de tratamento de água eficazes, à estrutura da comunidade microbiana de biofilmes em diferentes meios de biofiltro, aos efeitos do tratamento e aos impactos no crescimento das espécies cultivadas. Três tipos de meios de biofiltro foram selecionados, entre os quais o meio de biofiltro de esponja quadrada e esfera de leito fluidizado são de baixo-custo e simples de operar, e têm sido amplamente utilizados no tratamento de águas residuais de aquicultura; Mutag Biochip 30 (abreviado como Biochip) é um novo tipo de meio de biofiltro que surgiu nos últimos anos, com vantagens de resistência ao impacto e longa vida útil, mas seus efeitos de aplicação prática não foram relatados. Para este propósito, a tecnologia de sequenciamento de alto- rendimento 16S rDNA foi usada para analisar a situação de formação de biofilme dos três meios de biofiltro de tratamento de água, enquanto analisava simultaneamente a situação de crescimento do largemouth bass, a fim de filtrar meios de biofiltro de tratamento de água práticos e fornecer meios de tratamento de água eficientes para a aquicultura recirculante industrializada de largemouth bass.
1. Materiais e Métodos
1.1 Materiais de Teste
Os meios de biofiltro selecionados para este teste foramesponja quadrada, Biochip, ebola de leito fluidizado, como mostrado emFigura 1. O material esponjoso quadrado é poliuretano, em forma de cubo com comprimento lateral de 2,0 cm, área superficial específica (3,2 ~ 3,5) × 10⁴ m²/m³. O material do Biochip é polietileno, em formato de círculo com diâmetro de 3,0 cm, espessura de cerca de 0,11 cm, área superficial específica 5,5×10³ m²/m³. O material da bola de leito fluidizado é polietileno, área de superfície específica efetiva de 500~800 m²/m³.
1.2 Agrupamento Experimental
O grupo de tratamento com meio de biofiltro de esponja quadrada foi definido como grupo T1, o biofilme de meio correspondente foi rotulado como B1 e a água de aquicultura correspondente foi rotulada como W1; o grupo de tratamento com meio de biofiltro Biochip foi definido como grupo T2, o biofilme de meio correspondente foi rotulado como B2 e a água de aquicultura correspondente foi rotulada como W2; o grupo de tratamento com meio de biofiltro de esfera de leito fluidizado foi definido como grupo T3, o biofilme de meio correspondente foi rotulado como B3 e a água de aquicultura correspondente foi rotulada como W3.
1.3 Sistema de Aquicultura
O experimento foi conduzido em um sistema de aquicultura recirculante na Base Experimental Abrangente de Balidian do Instituto de Pesca de Água Doce de Zhejiang.Foram 9 tanques de cultivo no total, volume 500 L, volume efetivo de água 350 L. O tanque biofiltro foi feito de um aquário plástico medindo 80 cm de comprimento, 50 cm de largura e 50 cm de altura, volume 200 L, volume efetivo de água 120 L. O tanque de cultura e o tanque do biofiltro foram conectados por uma bomba de água para formar uma circulação interna, vazão de 3 a 4 L/min, com aeração para oxigenação, oxigênio dissolvido em água mantido acima de 5 mg/L. Os meios de biofiltro foram agrupados aleatoriamente, cada tipo de meio de biofiltro tinha 3 réplicas, cada tanque de biofiltro foi carregado com 2,0 kg de meio de biofiltro, enquanto suspendia simultaneamente uma fonte de carbono de liberação-lenta. Durante o período de cultivo do biofilme, 10% da água foi trocada diariamente.Indicadores iniciais de qualidade da água: Nitrogênio Total (TN) 9,41 mg/L, Fósforo Total (TP) 1,02 mg/L, Nitrogênio Amoniacal (TAN) 1,26 mg/L, Nitrogênio Nitrito (NO₂⁻-N) 0,04 mg/L, Índice de Permanganato (CODₘₙ) 3,73 mg/L.
1.4 Teste de manejo de peixes e cultura
O robalo Largemouth foi usado como espécie cultivada. Antes do início do teste, eles foram aclimatados na água recirculante por 7 dias.O teste foi realizado de 11 de agosto de 2022 a 22 de setembro de 2022, com duração de 42 dias. Largemouth bass sem lesões superficiais, saudáveis e vivos, foram selecionados para agrupamento, 60 peixes foram estocados em cada tanque de cultura, alimentados duas vezes ao dia, os horários de alimentação eram 07:00 da manhã e 16:00 da tarde, a quantidade diária de alimentação representava cerca de 1,0% ~ 1,5% da massa corporal total dos peixes. A massa corporal inicial do peixe teste foi (20,46 ± 0,46) g.
1.5 Coleta de Amostras
Amostras de água do tanque do biofiltro foram coletadas a cada 2 dias, registrando indicadores como temperatura da água, oxigênio dissolvido, valor de pH e medindo nitrogênio amoniacal e nitrogênio nitrito. A quantidade de alimentação, a massa corporal dos peixes no início e no final do experimento e a taxa de sobrevivência foram registradas. Após o experimento, 1 L de água de cada tanque de cultivo foi coletado usando sacos coletores de água estéreis, filtrado através de membrana filtrante de 0,22 µm e armazenado em freezer a -80 graus para uso posterior. Amostras de meio filtrante de 0,5 g foram retiradas assepticamente de cada tanque de biofiltro, armazenadas em água destilada esterilizada, agitadas vigorosamente para desalojar microorganismos da superfície do biofilme, depois filtradas através de uma membrana filtrante de 0,22 µm e armazenadas em freezer a -80 graus para uso posterior.
1.6 Métodos de Medição
1.6.1 Medição da Qualidade da Água
A temperatura da água, o oxigênio dissolvido e o valor do pH foram detectados usando umAnalisador portátil de qualidade de água HACH Hq40d. A concentração de nitrogênio amoniacal foi medida usando o método espectrofotométrico do reagente de Nessler. A concentração de nitrogênio nitrito foi detectada pelo método espectrofotométrico de ácido clorídrico naftiletilenodiamina.
1.6.2 Medição do Desempenho da Aquicultura
As fórmulas de cálculo para a taxa de ganho de peso, taxa de conversão alimentar e taxa de sobrevivência dos peixes são as seguintes.
l Taxa de ganho de peso= (Massa corporal final do peixe - Massa corporal inicial do peixe) / Massa corporal inicial × 100%;
l Taxa de conversão alimentar= Consumo de ração / Ganho de peso;
l Taxa de sobrevivência= (Número de peixes no final do experimento / Número inicial de peixes no início do experimento) × 100%.
1.6.3 Sequenciamento microbiano-de alto rendimento
O DNA bacteriano foi extraído da água e do biofilme usando um kit de extração de DNA bacteriano (OMEGA Biotech, EUA). Os iniciadores específicos 338F (5'-ACTCCTACGGGAGGGCAGCAG-3') e 806R (5'-GGACTACHVGGGTWTCTAAT-3') foram utilizados para amplificar as regiões V3 e V4 do rDNA 16S bacteriano. A PCR utilizou o sistema de reação TransGen AP221-02: 4 µL de 5×FastPfu Buffer, 2 µL de 2,5 mmol/L dNTPs, 0,4 µL de FastPfu Polymerase, 0,8 µL de cada um de 5 µmol/L de primers forward e reverse, 0,2 µL de BSA, 10 ng de modelo de DNA, suplementado com ddH₂O a 20 μL. Condições de reação PCR: 95 graus por 3 min; 95 graus por 30 s, 53 graus por 45 s, 72 graus por 1 min, 28 ciclos; Extensão de 72 graus por 10 min. A amplificação por PCR foi realizada em um instrumento de reação PCR 9700 (Applied Biosystems® GeneAmp®, EUA). Os produtos de PCR foram purificados usando Beads e depois submetidos a sequenciamento. O sequenciamento foi encomendado à Shanghai Majorbio BioPharm Technology Co., Ltd.
1.6.4 Análise da Diversidade Microbiana
Os dados brutos obtidos do sequenciamento foram primeiro emendados, seguidos pela filtragem de controle de qualidade da qualidade das leituras e efeito de emenda, e correção da direção da sequência, resultando em dados otimizados. Após normalizar os dados limpos finalmente obtidos, a análise de agrupamento de OTU (Unidades Taxonômicas Operacionais) e a análise taxonômica foram realizadas com 97% de similaridade. Os histogramas das amostras foram traçados no Excel e os mapas de calor foram elaborados na plataforma Majorbio Cloud.
1.7 Análise de Dados
O software estatístico SPSS 16.0 foi utilizado para análise de significância das diferenças e o método de análise de variância de Duncan (ANOVA) foi utilizado para comparações múltiplas.
2. Resultados e Análise
2.1 Tempo de formação de biofilme de diferentes meios de biofiltro
Como mostrado emFigura 2,sob condições naturais de formação de biofilme, o teor de nitrogênio amoniacal na água do tanque do biofiltro mostrou uma tendência de aumento rápido seguido de declínio gradual.O teor de nitrogênio amoniacalna água do tanque do biofiltro correspondente à esponja quadrada atingiu seu pico aos 17 dias, em 8,13 mg/L, depois diminuiu gradativamente,atingindo o mínimo em 41 dias, permanecendo depois em torno de 0,20 mg/L, indicando queo tempo de formação do biofilme para a esponja quadrada foi de cerca de 17 dias. As alterações no teor de nitrogênio amoniacal na água dos tanques de biofiltro correspondentes ao Biochip e à bola de leito fluidizado foram basicamente as mesmas, apresentando alterações flutuantes. O pico de nitrogênio amoniacal apareceu aos 21 dias, em 7,88 mg/L e 7,57 mg/L respectivamente, indicando queo tempo de formação do biofilme para o Biochip e o meio de biofiltro de esfera de leito fluidizado foi de cerca de 21 dias. O teor de nitrogênio amoniacalnos tanques de biofiltro correspondentes aessas duas mídias caíram para o nível mais baixo, 43 dias e 45 dias, respectivamente.
2.2 Mudanças no valor do pH da água em diferentes tanques de cultura
DeFigura 3, pode-se observar que o valor inicial do pH da água de cultivo foi de 7,3. À medida que o tempo de cultura se estendeu, o valor do pH da água em cada tanque de cultura apresentou uma tendência decrescente. Após 12 dias, o valor do pH de todos os tanques de cultivo era inferior a 6,0, o que é desfavorável ao crescimento das espécies cultivadas.Portanto, após 12 dias de formação de biofilme, deve-se prestar atenção ao ajuste do valor do pH da água do tanque de cultura.
2.3 Análise da composição da comunidade microbiana em biofilmes de diferentes meios de biofiltro e em água
2.3.1 Composição da Comunidade Microbiana no Nível do Filo
Como mostrado emFigura 4,no nível do filo, as bactérias dominantes nos biofilmes dos três meios de biofiltro eram as mesmas, sendo todas Proteobacteria, Actinobacteriota, Bacteroidota e Chloroflexi. Suas abundâncias relativas combinadas foram de 68,96%, 64,74% e 65,45%, respectivamente. As bactérias dominantes na água de cultura correspondente eram diferentes. A bactéria dominante em W1 foi Actinobacteriota, com abundância relativa de 64,66%. As bactérias dominantes em W2 e W3 foram Proteobacteria, com abundâncias relativas de 34,93% e 50,10% respectivamente.

Fig. 4 Composição da comunidade de bactérias em diferentes biofilmes e água em nível de filo
2.3.2 Composição da Comunidade Microbiana em Nível Familiar
Como mostrado emFigura 5, nos biofilmes dos três meios, cerca de 48% das bactérias eram comunidades bacterianas com abundâncias relativas inferiores a 3%. As bactérias dominantes de B1 e B2 foram as mesmas, sendo ambas Xanthomonadaceae, com abundâncias relativas de 11,64% e 9,16% respectivamente; a bactéria dominante de B3 foi JG30-KF-CM45, com abundância relativa de 10,54%. As bactérias dominantes na água de cultura eram diferentes daquelas no meio de biofiltro. Microbacteriaceae foi a bactéria dominante absoluta em W1, com abundância relativa de 62,10%; as bactérias dominantes em W2, além de Microbacteriaceae (13,82%), incluíam também uma certa proporção de Rhizobiales (8,57%); a bactéria dominante em W3 foi Rhizobiales, com abundância relativa de 38,94%, seguida por Flavobacteriaceae, com abundância relativa de 15,89%.
As 50 principais espécies em nível de gênero foram contadas. Após o processamento dos valores numéricos, as alterações de abundância das diferentes espécies nas amostras foram exibidas através do gradiente de cores dos blocos de cores. Os resultados são mostrados emFigura 6. Leifsonia foi a bactéria dominante em W1, com abundância relativa de 56,16%; as bactérias dominantes em W2 foram Leifsonia (10,30%) e Rhizobiales_Incertae_Sedis (8,47%); a bactéria dominante em W3 foi Rhizobiales_Incertae_Sedis, com abundância relativa de 38,92%. Entre as bactérias identificáveis nos biofilmes, Thermomonas foi o gênero dominante em B1, com abundância relativa de 4,71%; os gêneros dominantes em B2 e B3 foram Nitrospira, com abundâncias relativas de 4,41% e 2,70% respectivamente.

Fig. 5 Composição da comunidade de bactérias em diferentes biofilmese água a nível familiar

Fig. 6 Mapa térmico da composição da comunidade bacteriana em diferentes biofilmes e água em nível de gênero
2.4 -Análise da diversidade de comunidades microbianas em biofilmes de diferentes meios de biofiltro e na água
Como mostrado emTabela 1, o índice de Shannon das comunidades microbianas nos biofilmes de diferentes meios foi maior que o da água de cultura correspondente, enquanto o índice de Simpson foi o oposto. Analisando a água de cultura correspondente, o índice de Shannon da comunidade bacteriana de W2 foi o mais alto, significativamente maior que o de W1 e W3, enquanto o índice de Simpson foi significativamente menor que o de W1 e W3, indicando que sua -diversidade foi a mais alta. Diferente da -diversidade da água de cultura, embora o índice de Shannon da comunidade microbiana bacteriana no meio B2 tenha sido o maior e o índice de Simpson o menor, não houve diferença significativa entre os três meios de biofiltro. A cobertura de sequenciamento de todas as amostras foi superior a 0,990, indicando que a profundidade de sequenciamento poderia refletir o verdadeiro nível das amostras.

2.5 Efeitos de Diferentes Meios de Biofiltro no Crescimento do Largemouth Bass
Tabela 2mostra a situação de crescimento do largemouth bass nos diferentes grupos de meios de biofiltro. Após 44 dias de cultura, a massa corporal final e a taxa de ganho de peso do largemouth bass no grupo de cultura de esponja quadrada foram significativamente maiores do que aquelas nos grupos bola de leito fluidizado e Biochip, e a taxa de conversão alimentar foi significativamente menor que a dos outros grupos. A taxa de sobrevivência do largemouth bass em cada grupo foi superior a 97%, sem diferença significativa entre os grupos.

3. Conclusão e Discussão
3.1 Tempo de formação de biofilme de diferentes meios de biofiltro
Os biofilmes se fixam na superfície do meio biofiltrante. O material, a estrutura e a área superficial específica do meio filtrante são os principais fatores que afetam a formação do biofilme. Existem dois métodos comuns para o cultivo de biofilme: o método de formação de biofilme natural e o método de formação de biofilme inoculado. Diferentes métodos de formação de biofilme afetam o tempo de maturação do biofilme. Hu Xiaobing et al. usaram quatro métodos diferentes para formação de biofilme, e os resultados mostraram que ao usar métodos como adição de quitosana, íons de ferro e inoculação com lodo descarregado para formação de biofilme, o tempo de maturação do biofilme foi menor do que o método natural de formação de biofilme. Embora a adição de microrganismos benéficos ou substâncias ativas possa encurtar o tempo de formação do biofilme, existem problemas como dificuldade na obtenção do inóculo, construção de processos complexos e alto custo. Guan Min et al., sob condições de baixo teor de matéria orgânica, utilizou diretamente água bruta para formação de biofilme, e o tanque do biofiltro foi iniciado com sucesso através da formação natural de biofilme após cerca de 38 dias. O resultado desta pesquisa é semelhante aos resultados deste estudo. Os resultados deste estudo mostram que, nas mesmas condições de formação de biofilme, o tempo de formação de biofilme da esponja quadrada foi menor que o dos outros dois meios filtrantes. Isto pode estar relacionado à grande área superficial específica, forte hidrofilicidade e facilidade de fixação do biofilme da esponja quadrada. A área superficial específica da esponja quadrada chega a 32.000~35.000 m²/m³, muito maior do que as outras duas mídias. Além disso, o material da esponja quadrada é o poliuretano, que se expande quando exposto à água, possui alta hidrofilicidade e favorece a fixação e o crescimento de microrganismos na água. Os resultados da pesquisa de Li Yong et al. também mostraram que o desempenho-de inicialização e a remoção de nitrogênio amoniacal da esponja de poliuretano foram melhores que os do polipropileno, o que é consistente com os resultados deste estudo. Além disso, neste estudo, a área superficial específica do meio de biofiltro Biochip foi tão alta quanto 5.500 m²/m³, muito maior do que a do meio de biofiltro de esfera de leito fluidizado, mas o tempo de formação do biofilme foi basicamente o mesmo que o do meio de esfera de leito fluidizado. Isso pode estar relacionado ao tamanho dos poros. Alguns estudos apontaram que a escala espacial interna dos meios de biofiltro afeta o crescimento de biofilmes. Embora alguns meios de biofiltro tenham uma grande área de superfície específica, seus poros são finos e o tamanho dos poros é muito menor que a espessura do biofilme maduro, o que pode facilmente levar ao bloqueio dos poros, dificultando o acúmulo máximo do biofilme nos poros. Os poros do Biochip são pequenos, resultando em crescimento mais lento do biofilme e maior tempo de formação do biofilme.
3.2 Composição da Comunidade Microbiana de Meios Biofiltrantes e Água de Cultura
Neste estudo, as bactérias dominantes no meio biofiltrante e na água de cultura correspondente eram diferentes. O índice de Shannon dos biofilmes no meio biofiltrante foi maior que o da água de cultura correspondente, indicando que o meio biofiltrante tem o efeito de enriquecer microrganismos. Isto é consistente com os resultados da pesquisa de Hu Gaoyu et al. Existem muitos factores que afectam a estrutura da comunidade microbiana, tais como tipo de transportador, profundidade do filtro, salinidade, concentração de matéria orgânica, etc. O mesmo meio de biofiltro, sob diferentes condições de cultura, terá diferentes comunidades microbianas no biofilme. O autor certa vez estudou a situação de formação de biofilme de meios filtrantes de esferas de leito fluidizado em um sistema de aquicultura recirculante para camarão gigante de água doce (Macrobrachium rosenbergii). Os resultados mostraram que o filo dominante em seu biofilme era Firmicutes, enquanto neste estudo, o filo dominante no biofilme de bola de leito fluidizado era Proteobacteria. A principal razão para esta diferença pode ser os diferentes ambientes de aquicultura. Os três meios de biofiltro utilizados neste estudo apresentaram as mesmas condições iniciais para o cultivo de biofilmes. É possível que devido às diferentes características físicas dos meios, a espessura do biofilme formado e o ambiente interno também sejam diferentes, resultando em diferenças nas comunidades microbianas. Portanto, a diferença nos portadores é a principal razão para as diferenças nas comunidades microbianas. Além disso, durante o processo de aquicultura, o ambiente aquático e a comunidade microbiana influenciam-se mutuamente. As razões para as diferenças nas comunidades microbianas podem estar relacionadas com factores ambientais. Por exemplo, a pesquisa de Yuan Cuilin indicou que o número total de bactérias heterotróficas no corpo; Fan Tingyu et al. acredita-se que o valor do pH pode afetar significativamente o conteúdo total de nitrogênio na água e desempenha um papel fundamental na distribuição de comunidades bacterianas aquáticas nas seções fluviais interiores. O nitrogênio amoniacal, o fósforo total e a clorofila a também influenciam a composição das comunidades bacterianas no corpo d'água em graus variados. Os fatores ambientais que causam as diferenças na composição da comunidade microbiana neste estudo ainda precisam de mais confirmação.
3.3 Efeitos de Diferentes Meios de Biofiltro no Crescimento do Largemouth Bass
A partir dos resultados de crescimento, o largemouth bass no grupo da esponja quadrada cresceu mais rapidamente, com uma taxa de ganho de peso significativamente maior do que a dos outros dois meios, e a menor taxa de conversão alimentar. Isto é consistente com resultados de pesquisas anteriores. Neste estudo, a formação de biofilme e a aquicultura foram realizadas simultaneamente. A julgar pelo tempo de formação do biofilme, o biofilme esponjoso quadrado amadureceu mais cedo e, após a maturação do biofilme, as concentrações de nitrogênio amoniacal e nitrito na água foram sempre inferiores às dos outros dois meios. Além disso, a esponja quadrada tem uma certa capacidade de filtração, o teor de sólidos em suspensão na água de cultura era menor e a água era relativamente límpida. O melhor crescimento do largemouth bass no grupo esponja quadrada pode estar relacionado à boa qualidade da água. No entanto, os efeitos de purificação do meio esponjoso quadrado sobre o nitrogênio total, o fósforo total e o índice de permanganato na água precisam de mais estudos. Vale ressaltar que durante o experimento o valor do pH apresentou tendência geral de queda. Após 12 dias de cultura, o valor do pH de todos os tanques de cultura era inferior a 6,0, o que é consistente com os resultados da pesquisa de Zhang Long et al. A diminuição do valor do pH ocorre porque um grande número de íons hidrogênio é produzido durante o processo de cultivo do biofilme, levando a uma diminuição do valor do pH da água. Portanto, durante o processo de formação do biofilme, é necessário ajustar prontamente o valor do pH da água do tanque de cultura para garantir que esteja dentro da faixa normal de crescimento das espécies cultivadas. Considerando o custo econômico, o preço de mercado da esponja quadrada é de 70 ~ 100 RMB/kg, e seu custo está entre os outros dois meios de biofiltro. Combinado com os resultados de crescimento, a curto prazo, a esponja quadrada é um meio de biofiltro de tratamento de água relativamente prático para a recirculação da aquicultura. No entanto, a esponja quadrada tem baixa tenacidade e vida útil curta. Seus-efeitos de uso a longo prazo e efeitos na aquicultura precisam de verificação adicional.
Resumindo,sob condições naturais de formação de biofilme, o meio de biofiltro de esponja quadrada tem o menor tempo de formação de biofilme, um preço moderado, e a massa corporal final e a taxa de ganho de peso do largemouth bass no grupo de esponja quadrada foram significativamente maiores do que as dos outros dois meios de biofiltro. No curto prazo, é um meio de biofiltro de tratamento de água relativamente prático para a recirculação da aquicultura.

